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订购我司人鼠疫耶尔森菌抗体(YSP-Ab)ELISA试剂盒

时间:2017-03-22      阅读:417

付老师成功订购我司人鼠疫耶尔森菌抗体(YSP-Ab)ELISA试剂盒

人鼠疫耶尔森菌抗体(YSP-Ab)ELISA试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中鼠疫耶尔森菌抗体(YSP-Ab)表达。
实 验 原 理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人鼠疫耶尔森菌抗体(YSP-Ab)表达。用纯化的抗
原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中鼠疫耶尔森菌抗体(YSP-Ab)相结合,经洗涤
除去未结合的抗体和其他成分后再与 HRP 标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合
物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作
用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值) ,与 CUTOFF 值相
比较,从而判定标本中人鼠疫耶尔森菌抗体(YSP-Ab)的存在与否。
试 剂 盒 组 成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 阳性对照 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 阴性对照 0.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂 A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂 B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
标 本 要 求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操 作 步 骤
1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1
孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先
加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不
触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色) 。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值) 。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
计 算 和 结 果 判 定 :
试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定:样品 OD 值< 临界值(CUT OFF)者为人鼠疫耶尔森菌抗体(YSP-Ab)阴

阳性判定:样品 OD 值≥ 临界值(CUT OFF)者为人鼠疫耶尔森菌抗体(YSP-Ab)阳

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