大鼠磷酸化AKT蛋白检测试剂盒
产品简介
详细信息
大鼠磷酸化AKT蛋白检测试剂盒*，售后服务完整。随时为您解决实验过程中的任何疑问。免除您的后顾之忧。并可以免费代检测，更好的为您服务。
大鼠磷酸化AKT蛋白检测试剂盒的选择之道：
1. 试剂盒特异性
2. 灵敏度和检测范围
3. 重复性
4. 经济性
5. 美誉度
大鼠磷酸化AKT蛋白检测试剂盒高背景或阴性对照值偏高：
可能原因 | 建议 |
阴性对照孔被阳性对照或样品污染 | 洗涤时，勿将洗液溢出孔外。 |
洗涤不充分 | 确保在洗涤时每个孔都充满了液体，确保将残余液体从孔中移除。 |
酶结合物过浓 | 请检查酶结合物是否按说明书规定稀释 |
孵育温度过高 | 检查孵育箱的温度是否正确、稳定 |
底物在使用前曝光 | 应保存在暗处，避光。 |
读板前停留时间过长 | 加终止液后3分钟内读数 |
大鼠磷酸化AKT蛋白检测试剂盒优势：
简单快速——仅需1h即可完成整个操作过程，比传统ELISA省时1/3；
选择灵活——可单独或同时检测总蛋白及磷酸化蛋白水平，也可在同一块板上检测通路中不同目的蛋白；
结果准确——与Western Blot相比，结果更准确；
兼容性好——常规比色法检测，使用实验室传统的酶标仪读数即可；
产品齐全——涵盖多个信号通路蛋白的检测，且不断开发新产品；
一、在对数坐标纸上手工绘制曲线（Log-logit双对数标准曲线）
1. 实验做双孔，实验结果如下表所示。
标准点 浓度 OD1 OD2 OD均 结合率
S0 0 2.226 2.192 2.209
S1 0.1 1.725 1.679 1.702 77.0%
S2 0.4 1.313 1.338 1.3255 60.0%
S3 1.6 0.907 0.834 0.8705 39.4%
S4 6.4 0.517 0.517 0.517 23.4%
S5 25.6 0.230 0.244 0.237 10.7%
2）各标准点吸光值取均值。在表中OD均一列。
3）将S1~S5的OD均值与S0的OD均相除，为标准点的百分结合率。
4）大鼠磷酸化AKT蛋白检测试剂盒在log-logit坐标纸上绘图。
5）坐标纸上横轴从左至右*个1-9表示为*个10进位，第二个1-9表示为第二个10进位。第三个1-9表示为第三个10进位。也就是说，如果*个1代表1ng/ml，则第二个1代表10ng/ml，第三个1代表100ng/ml。因为本次实验标准曲线范围是从0.1ng/ml到25.6ng/ml，则可以用*个1代表0.1ng/ml，第二个1代表1ng/ml，第三个1代表10ng/ml。
6）坐标纸纵轴为百分比。即各标准吸光值的百分结合率。
7）曲线*个数值点是（0.1，77.0%）。则在横轴左起点的1处向上至70~80之间，由70向上7个小格处。
8）曲线第二个数值点是（0.4，60.0%）。则在横轴左起*个4，向上至60的位置。
9）曲线第三个数值点是（1.6，39.4%）。则在横轴左起第二个1至2之间，由第二个1向右6个小格。再向上至30~40之间，由30向上9个半小格处。
10）曲线第四个数值点是（6.4，23.4%）。则在横轴左起第二个6至7之间，这里6与7之间分为5小格，则每个小格是0.2。所以由第二个6向右2个小格。再向上至20~30之间，由20向上约3个半小格处。
11）大鼠磷酸化AKT蛋白检测试剂盒曲线第四个数值点是（25.6，10.7%）。则在横轴左起第三个2至3之间，这里2与3之间分为10小格，则每个小格是1。所以由第三个2向右5个半小格。再向上至10~20之间，由10向上约半小格处。
12)画一条通过各点的直线。要求尽可能多的点在线上，同时剩余的点均匀分布在直线的两边。
13）样品也同样由吸光值计算百分结合率，再从纵轴上的相应结合率找到直线上的点，此点对应的横坐标浓度即为样品的浓度。无须换算。