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人Serpin A4/Kallistatin检测试剂盒

产品名称 Serpin A4/Kallistatin（h） ELISA kit
特异性 人Serpin A4
检测标本 人血清、血浆、细胞培养上清
检测范围 0.156→10ng/ml
保存条件 4℃六个月，-20℃一年。
人Serpin A4/Kallistatin检测试剂盒内容 1.重组人Serpin A4冻干标准品，10ng/管，总2管。
  2.预包被抗人Serpin A4抗体的96孔板。
  3.样品稀释液，30ml。
  4.*标记抗人Serpin A4(100X)，130μl，效价1：100。
  5.抗体稀释液，12ml。
  6.亲和素-过氧化物酶复合物（ABC）(100X)，130μl，效价1：100。
  7.ABC稀释液，12ml。
  8.TMB显色液，10ml。
  9.TMB终止液，10ml。
  10.洗涤缓冲液(25X)，20ml。
  11.封板膜，4张

人Serpin A4/Kallistatin检测试剂盒标准曲线可以绘成直线或是曲线(二次方程或三次方程)。通常是选取线性比较好的几个点绘成直线。直线斜率越高说明抗体的特异性及灵敏性好，R2值越靠近1，则说明线性关系好。曲线绘好后，有一些常用的参数，如抑制率、半数抑制、检测限、定量限、标准偏差、变异系数等等：

  1.抑制率(%)＝1－B/B0(B0为不含药物的OD值；B为含有药物的OD值)

  2.标准差(SD)＝[∑(Xi－B)2/(n－1)]1/2；

  3.标准偏差(RSD)＝SD/B

人Serpin A4/Kallistatin检测试剂盒半数抑制：指用药物(半抗原)去做竞争实验时呈现50%抑制效果时的药物浓度。药物浓度越低，而抑制率越高，则表示抗体对药物的特异性越好，灵敏度也高。

  半数抑制浓度IC50对应的OD值：OD IC50＝0.5 B0

  检测下限(LOD)对应的OD值：ODLOD=B0－3SD；

  定量限(LOQ)对应的OD值：ODLOQ=B0－10SD

间接ELISA操作中具体注意的问题

  间接ELISA一般有6个步骤：人Serpin A4/Kallistatin检测试剂盒包被抗原、封闭、加一抗(在做竞争时同时加入药物)、加二抗、显色、终止。其中除了加显色和终止外，其余步骤之间都要进行洗板。在这里面，每一步都非常重要，假如有一步疏忽都会造成结果的不准确。通常ELISA结果会出现如空白显色、阴性偏高、方阵梯度不明显，还有如何提高间接竞争ELISA灵敏度等问题。