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中文名称：鸡线粒体促凋亡蛋白(SMAC)ELISA试剂盒

英文简称：Chicken SMAC ELISA Kit

检测样本：血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆及相关生物液体

血清：不含抗凝剂的/含促凝剂。（通常为红色、黄色、橘色管盖的）

血浆：含抗凝剂。（通常为绿色、紫色管盖的 ）

样品收集后若在1周内进行检测可保存于2-8℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃(1个月内检测)，或-80℃(3个月内检测)，避免反复冻融。在检测前，冷冻过的样本应缓慢地融化并离心除去冻融过程产生的沉淀物。

虽然 ELISA 的操作步骤是相同的，但每次实验的各种影响因数都是有所变化的，所以每次实验时必须重新制作标准曲线，以便得到更准确可靠的检测结果。如果需要做多次实验，溶解后的高浓度标准品可以分装保存于-20℃，避免反复冻融，有效期内用掉。  

ELISA 实验通常以细胞培养上清液、血清、血浆以及组织裂解物等为样品。该实验三种试剂：固相的抗原或抗体；酶标记的抗原或抗体；酶作用的底物。根据样品的性质、检测的实验条件、试剂的来源，可设计出不同类型的ELISA检测方法。

一、直接ELISA

   原理：将抗原与固相载体连接，洗涤除去未结合的抗原及杂质。加酶标抗体进行孵育。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。*洗涤未结合的酶标抗体。此时固相上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。加底物反应。直接法主要用于测定抗原。

   优点：操作流程简短，实验步骤少；无需使用二抗，避免了交叉反应；实验步骤少，操作不易出错。

   缺点：实验中的一抗需要直接用酶标记，成本相对较高。

二、间接法ELISA

    原理：将抗原与固相载体相连结，形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。加入特异性一抗与固相抗原相结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，加酶标二抗。固相免疫复合物中的抗体与酶标二抗结合，从而间接地标记上酶。洗涤后，加底物显色。

   优点：酶标二抗可加强信号，提高灵敏度；灵活性更大，同一酶标二抗可应用于多种不同的一抗；不直标一抗，可保留更多的免疫反应性；成本更低，使用标记抗体更少。

   缺点：交叉反应几率升高。

三、双抗夹心法ELISA

   原理：双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子，但不适用于小分子抗原。将特异性抗体（捕获抗体）与固相载体连接，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。加入待检样品，保温孵育。样品中的特异性抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。加酶标抗体（检测抗体）保温孵育。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。*洗涤未结合的酶标抗体。加底物反应。

双抗原夹心法测抗体的反应模式与测抗原相似，用特异性抗原进行包被和制备酶结合物，以检测相应的抗体。

   优点：高特异性，使用的捕获抗体与检测抗体都是检测特异性的；适用于复杂样品，抗原不需要进行纯化即可用于检测；灵活性更大，灵敏度更高，可采用直接法也可采用间接法。
  缺点：检测物需要拥有两个以上不同的抗原表位或多个相同的重复表位；不适用于检测小分子物质。

四、竞争法ELISA

   原理：竞争法ELISA为复杂，通常用于检测小分子如半抗原、激素、药物等。样品中待检游离抗原与固定于固相载体上的抗原一起竞争相同的有*抗体，当样品中的游离抗原越多，就可结合越多的抗体，而固相抗原只能结合较少的抗体。反之亦然。经洗涤去除样品中的抗原与抗体的结合物，只留下固相抗原与抗体的结合物。显示经计算可得样品中抗原的含量。竞争法可根据实验设置直接法、间接法或夹心法形式。

友情提醒：                                        

试剂盒使用完毕后，请妥善处理相关耗材，避免环境污染！