目标蛋白质组(MRMHR)技术
时间:2017-05-03 阅读:299
目标蛋白质组(MRMHR)技术
MRM(Multiple reaction monitoring)作为一种质谱检测的分析方法,具有特异性强、灵敏度高、准确度高、重现性好、线性动态范围宽、自动化高通量的突出优点,在基于蛋白质组学的生物标志物研究、蛋白质翻译后修饰、定量蛋白质组和蛋白质相互作用等研究领域应用较为广泛。而MRMHR是一种高分辨率率的MRM,可以在5600-plus仪器上实现。
技术原理
质谱多反应监测技术(Multiple reaction monitoring,MRM)是一种基于已知信息或假定信息设定质谱检测规则,对符合规则的离子进行信号记录,去除大量不符合规则离子信号的干扰,从而得到质谱信息的一种数据获取方式。对于MRM技术而言关键在于首先要能够检测到具有特异性的母离子,然后只将选定的特异性母离子进行碰撞诱导(collision-induced),zui后去除其他子离子的干扰,只对选定的特异子离子进行质谱信号的采集。
武汉华美生物工程有限公司依据前人的工作在AB SCIEX的5600-plus 仪器上开发出了MRMHR技术,因为MRMHR采纳了高精度的数据,因此选择transition更加可信,定量更加准确。
技术特点
l 灵敏度高:通过两级离子选择,排除大量干扰离子,使质谱的化学背景降低,目标检测物的信噪比显著提高,从而实现检测的高灵敏度。
l 重现性好:在MRMHR 技术选择性的质谱信号采集中,避免了待测分子离子化、质谱信号的抑制及源内碰撞碎裂过程的影响,因此重现性也相应提高。
l 准确度高:利用MRMHR技术的特异性,进行连续增强的离子扫描分析,得到高分辨的串联质谱(MS/MS)碎片数据,与全扫描和中性丢失质谱扫描模式相比降低了分析过程中定性结果的假阳性率,保证了分析的准确度。
l 通量高:使用目前的质谱系统,MRMHR技术每个工作循环能处理多达300对母离子-子离子对,这种特点为研究多种蛋白质的多种修饰和丰度变化提供了机会,更能满足蛋白质组学的研究需求。