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人uPAR检测试剂盒
产品名称 uPAR(h) ELISA kit
特异性 系统和其它细胞因子无交叉反应。
检测标本 人血清、血浆、体液、组织匀浆或细胞培养上清
检测范围 62.5pg/ml→4000pg/ml
敏感性 <4pg/ml
保存条件 4℃六个月,-20℃一年。
人uPAR检测试剂盒
背景资料
u-Plasminogen Activator/Urokinase, uPA, *型纤溶酶原激活因子, 是一个有严格底物限制的*酶,切除纤溶酶原中的Cys-Pro-Gly-Arg560-Val1561-Val-Gly-Cys序列,形成纤溶酶。uPAR是细胞膜表面受体, 对uPA有高亲和力,从而促进细胞外纤溶酶原的激活。uPA,uPAR,PAI-1构成了调节细胞吸附、移动、增生和分化的三重体系。人的uPAR初始合成时有335个氨基酸(N端22个氨基酸的引导片段),羧基端进一步切除30个氨基酸后,通过糖化磷脂酰肌醇(glycosyl phosphatidylinositol, GPI)连接到细胞膜。所以成熟uPAR有283个氨基酸。
UPA/uPAR系统除了活化纤溶酶原外,还有一些其它功能,如uPAR还参与细胞的吸附。
本试剂盒所用标准品为人重组uPAR,有287个氨基酸,分子量分别为31KDa。
人uPAR检测试剂盒方法的优缺点:
①.优点:出现阳性结果时间较短,且较明显;
②.缺点:有时候,在用枪头吸出细胞生长液时,容易出现污染;
使用本方法时的注意事项:
①.稀释病毒时,每做一个病毒稀释度都需要换枪头,减少浓度误差;
②. 人uPAR检测试剂盒96孔板,每孔接种的细胞量:一般在此种测定病毒滴度的方法下,要将细胞密度适当调低,至少要比正常传代时低一些,否则细胞生长速度过快,未到7天则细胞出现死亡,对观察CPE不利.一般情况下,小塑料瓶(8-9ml液体为正常用量),培养长慢单层后,消化细胞,加入6ml培养液,吹匀,吸出其中的2ml,到另外的瓶子,在该瓶中加入14-16ml即可,如果不放心,可以用显微镜看一下,细胞数过多则补加培养液,少则补加剩余4ml的细胞悬液;
人uPAR检测试剂盒病毒滴度计算公式:
距离比例=大于50%的阳性百分比-50/大于50%的阳性百分比-小于50%的阳性百分比
TCID50的对数=大于50%的阳性百分比的zui高稀释度对数+距离比例X稀释度间距的对数
(如果1:10稀释,则稀释度间距的对数为1;如果1:5稀释,则稀释度间距的对数为0.7;如果倍比稀释,则稀释度间距的对数为0.3;如果半对数稀释,则稀释度间距的对数为0.5)根据得到的结果查反对数表就可以了。