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上海市所在地
小鼠VEGFR2/KDR检测试剂盒
产品名称 VEGFR2/KDR(m) ELISA Kit
特异性 小鼠VEGFR2/KDR
检测标本 血清、细胞培养上清
检测范围
62.5→4000pg/ml
保存条件 4℃六个月,-20℃一年。
小鼠VEGFR2/KDR检测试剂盒
背景资料 VEGF R1(Flt-1), VEGF R2(KDR/Flk-1), VEGF R3(Flt-4)都属于受体*激酶(RTKs)家族第三亚族。VEGF R1,2,3几乎都在内皮细胞上表达,这些受体裁在血管增生和血管形成过程中起基本作用。人的VEGF R2的前体有1356个氨基酸,19个氨基酸的引导肽。成熟形态包括745个氨基酸的细胞外部分,25个氨基酸的跨膜区和567个氨基酸的细胞内部分。本试剂盒所用的标准品为重组人VEGF R2。一条DNA链表达VEGF R2的细胞外部分(1-764aa),融合到6个*(HHHHHH),通过多肽IEGRMD附着在人IgG1上(100-330aa)。此嵌合体在小鼠骨髓细胞系NSO表达。二条总计988个氨基酸的多肽链经二硫键连接而成。计算分子量110KDa。由于糖化结果,分子量为160-170KDa。
小鼠VEGFR2/KDR检测试剂盒方法的优缺点:
①.优点:出现阳性结果时间较短,且较明显;
②.缺点:有时候,在用枪头吸出细胞生长液时,容易出现污染;
使用本方法时的注意事项:
①.稀释病毒时,每做一个病毒稀释度都需要换枪头,减少浓度误差;
②. 小鼠VEGFR2/KDR检测试剂盒96孔板,每孔接种的细胞量:一般在此种测定病毒滴度的方法下,要将细胞密度适当调低,至少要比正常传代时低一些,否则细胞生长速度过快,未到7天则细胞出现死亡,对观察CPE不利.一般情况下,小塑料瓶(8-9ml液体为正常用量),培养长慢单层后,消化细胞,加入6ml培养液,吹匀,吸出其中的2ml,到另外的瓶子,在该瓶中加入14-16ml即可,如果不放心,可以用显微镜看一下,细胞数过多则补加培养液,少则补加剩余4ml的细胞悬液;
小鼠VEGFR2/KDR检测试剂盒病毒滴度计算公式:
距离比例=大于50%的阳性百分比-50/大于50%的阳性百分比-小于50%的阳性百分比
TCID50的对数=大于50%的阳性百分比的zui高稀释度对数+距离比例X稀释度间距的对数
(如果1:10稀释,则稀释度间距的对数为1;如果1:5稀释,则稀释度间距的对数为0.7;如果倍比稀释,则稀释度间距的对数为0.3;如果半对数稀释,则稀释度间距的对数为0.5)根据得到的结果查反对数表就可以了。