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细胞糖胺多糖(GAG)总含量二甲基亚甲基蓝比色法定量检测试剂盒

时间:2017-11-27      阅读:323

主要用途

细胞糖胺多糖(GAG)总含量二甲基亚甲基蓝(DMMB)比色法定量检测试剂是一种旨在通过高盐萃取可溶性糖胺多糖,与二甲基亚甲基蓝染料结合,在丙醇解离溶液中,释放紫红色染料,由分光光度仪比色分析,定量检测细胞样品中糖胺多糖含量的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种人体或动物细胞(皮肤、肌肉、软骨、肿瘤)等糖胺多糖水平检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测准确。

技术背景

糖胺多糖(glycosaminoglycan;GAG),又称为粘多糖(mucopolysaccharide),是体内zui为丰富的异源多聚糖。糖胺多糖是一种未分叉的负电荷性长链多聚糖,由重复的二糖单位,包括六碳糖(hexose)或己糖醛酸(hexuronic acid),链接到己糖胺(hexoamine)上而成。糖胺多糖与核心蛋白(core protein)共价相联,构成蛋白多糖(proteoglycan;PG),成为细胞膜和细胞外基质(extracellular matrix;ECM)的主要成分。蛋白多糖的糖胺多糖在合成过程中发生硫酸酯化(sulfated group),其部位在O或N位上,有利于发挥各种不同的作用,包括酶的调节、细胞黏附、生长、迁移、分化,以及组织损伤反应。基于糖胺多糖的高度负电荷的特点,使用异染性(metachromatic)阳离子蓝色染料二甲基亚甲基蓝(1,9-dimethylmethylene blue;DMMB),在酸性条件下,特异性的结合产生不溶性紫色或粉红色糖胺多糖染料复合物(Dye-GAG complex),在丙醇解离溶液中,释放出染料,通过分光光度仪(656nm波长)测定,来定量分析糖胺多糖的总含量。


用户自备

1.5毫升离心管:用于样品操作的容器
15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
细胞刮脱棒:用于细胞脱离
恒温水槽或干式恒温仪:用于样品反应
微型台式离心机:用于样品操作 
比色皿或96孔板:用于比色分析的容器
分光光度仪或酶标仪:用于比色分析


注意事项

1.本产品为25次操作,包括标准样品
2.本产品不适合于非硫酸酯化的二糖降解片段、透明质酸(hyaluronate)的检测
3.本产品可以检测*(chondroitin sulfate)、硫酸角质素(keratan sulfate)、硫酸皮肤素(dermatan sulfate)、硫酸类肝素(heparan sulfate)等主要糖胺多糖
4.本产品检测范围为0.2至5微克糖胺多糖
5.操作时,须戴手套
6.系统操作时,标准样品测定只需1次
7.空白对照读数通常小于0.06,如果超过表明抽去上清操作不当
8.孵育时,避免光照
9.如果样品糖胺多糖含量过低,可以浓缩样品或增加样品量至100微升
10.样品浓度可以表述为:微克糖胺多糖/细胞量;微克糖胺多糖/细胞总蛋白等
11.本公司提供系列糖类代谢检测试剂产品
 
质量标准

1.本产品经鉴定性能稳定
2.本产品经鉴定检测敏感

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