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尼康A1共聚焦激光显微镜系统通过新的创造使得共聚焦成像达到一个新的质量水准并具有多种功能。全自动的A1和高规格的A1R共2个型号可供选择。A1使用传统的成对检流计来获得高至4096x4096解析度的图像, A1R引入一个*的混合扫描器系统提供贞速达30fps的512x512像素成像。可以便利的在超高速成像时得到卓绝的图像质量。此外,混合扫描器使得同步光活化和成像成为可能,这些对于揭示细胞动力学和相互作用都是至关重要的。
A1R加入了一个共振频率为7.8kHz的共振扫描器来达到420 fps (512 x 32像素) 的高速成像。在512X512分辨率下可达到30fps。并且,共振扫描器视野区域和检流计扫描器视野区域*重合,常规检流计扫描器也可达到10fps(512X512)的速度。尼康的光学时钟产生方法在速度时也能实现高的图像质量。其光纤通讯数据传输系统传输速度可达4 Gbit/s。
*的速度可实时观察血流中细胞的移动(红色:血管;绿色:细胞核,120pfs)
• 光活化同步高速成像
高速光活化成像由于非共振扫描器和共振扫描器集成在一个单元里,不需要另配独立的用来做光活化的激光器,光活化和荧光成像就可以同时进行。拥有可以高速成像的共振扫描器使得光活化后快速变化信号的获取成为可能。
光活化释放组胺而引起细胞内的钙离子浓度发生变化,上图显示Yellow Cameleon 3.60 CFP、YFP两基团发生FRET现象的过程(使用457nm激光成像,拍摄速度光活化同步成像速度30pfs)。
尼康的混合式扫描头同时配备检流计与共振式扫描装置,并允许通过超高速选择器灵活转换使用或者同时使用两组扫描装置。
检流计扫描器单次扫描可获得高达4096X4096分辨率。同时借助新开发的驱动与采样系统,及图像校正科技,可以10pfs(512X512)的速度高速获取图像。
四色标记斑马鱼图像(蓝:胞核、绿:瞳孔、黄:神经、红:肌肉)
扫描头中的二向色镜采用平均98%透射率的低角度二向色镜,荧光强度得到30%的增强。
同时采用尼康的六边形针孔相对于传统的方形针孔荧光采集量可提高30%。
尼康*的光学设计使成像更明亮。这样可以使激光曝光强度最小化,减少了细胞损伤。
| 磷砷化镓(GaAsP)高灵敏度探测器
尼康研发的磷砷化镓多通道荧光探测器配备两通道GaAsP高灵敏度检测器与两通道普通PMT检测器。检测波长范围达到400-750nm。
GaAs PMT的量子效率可提高一倍。远优于普通PMT。
GaAsP PMT的灵敏度远高于普通PMT,即使是过去所很难拍摄的弱荧光样品也可获得具有极低背景噪声的高亮度图像。
| 获取明亮清晰图像的VAAS针孔元件
尼康开发了一项称为虚拟可调孔径系统(VAAS)的创新技术,能在保持图像亮度的情况下去除模糊。针对通过针孔的光和非通过针孔的光进行去卷积,得到更明亮的图像,从而提高信噪比。
使用NIS-Elements C控制软件将共聚焦成像系统、显微镜及周边设备合为一体,并具备简单直观的操作界面。同时提供可靠全面的后期分析功能。
基础设置
光路设置
以Ti-E倒置显微镜为基础可将共聚焦系统与N-SIM/N-STORM 超分辨率系统、TIRF系统、光谱检测与对焦系统整合提供多模式的成像方案。同时所有的系统都可在同一NIS-Elements平台下工作。