质粒小量提取试剂盒常见问题与解析
- 发布时间：2020/10/30 9:34:50
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质粒小量提取试剂盒常见从1～4mL菌液可以抽提到5～30?g的质粒，纯度高，OD260/OD280比值一般为1.8-2.0之间，质粒可直接用于PCR、酶切、转化测序和体外转录等后续实验。那么在实验过程中常见问题有哪些，下面跟小编一起来看一下。
质粒得率低可能原因及解决办法：
1、菌体未活化，生*率低，菌量少。需要活化菌种。
2、属于低拷贝质粒，增加菌液的量。
3、SolutionB裂解不充分，室温静置5min。
4、后洗脱体积不够，洗脱液不少于50?L。
质粒纯度差可能原因：
1、SolutionA未加入RNaseA或加入RNaseA的SolutionA 未4℃保存。
2、加入SolutionB剧烈震荡，使得基因组断裂。
3、加入BufferN操作慢，形成微小沉淀，蛋白质无法被充分漂洗干净。
4、BufferW2未加入无水乙醇。
5、OD260/OD280比值一般在1.8-2.0之间，小于1.8可能有蛋白污染，大于2.0有部分降解或RNA污染。