实验材料    组织样品
试剂、试剂盒    PBS抗体
仪器、耗材    玻片加湿盒
实验步骤    
1.  将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片，放入玻片盒中（每边放6片），或故湿盒中（载玻片勿相互接触）。
 
2.  待载玻片达室湿且未干时，铺加PBS于切片上（勿溢出玻片）。
 
3.  稀释的*杭体于4℃用微量离心机以13 500 g 离心2 min（每一载玻片上加40~50 μl 抗体，应能盖住切片）。
 
4.  用与泵相连的巴斯德吸管，在切片的一端吸去玻片上的PBS，并从另一端加上抗体，盖上加湿盒，室温温育1 h。

5.  以PBS冼玻片3次（5 min/次），从切片一端加入新的PBS缓冲液，由另一端吸去旧的缓冲液。
 
6.  稀释的第二抗体于4℃用微量离心机以13 500 g 离心2 min（每载玻片可加40~50 μl 抗体）。
 
7.  将第二抗体加于切片上，置加湿盒中室温温育1 h，以PBS洗玻片3次（5 min/次）。
 

图一、免疫组化标记的各种方法
 
8.  将盖玻片放于纸巾上，滴加1滴Gelvatol 于盖玻片*。翻过载玻片放于盖玻片上（勿施压），将玻片置工作台上，用铝箔覆盖避光放置30 min，使Gelvatol 凝结。
 
9.  显微镜下观察结果，或置玻片盒中贮于4℃。